نسبة الحمى المالطية في الدم
نسبة الحمى المالطية في الدم مرحبا متابعي موقع صحة أون لاين عزل البروسيلا - الحمى المالطية -هو المعيار الذهبي في التشخيص المختبري لداء البروسيلات. بما
أن البروسيلا داخل الخلايا ، وعدد البكتيريا الدورية عادة ما يكون منخفضًا ، فإن إزالة
/ تخفيف المواد المضادة للبكتيريا ، وتركيز البكتيريا وظروف الثقافة المثلى قد يعزز
معدل العزلة.
الأهداف والغايات
كان الهدف من الدراسة التالية لمقارنة تركيز التحلل (LC) ،
ثقافة تجلط الدم وتقنيات ثقافة
Castaneda التقليدية لمعدل العزلة ووقت الانتعاش في تشخيص - الحمى المالطية - داء البروسيلات
البشري.
المواد والأساليب المستخدمة في الدراسة
تم تنفيذ مزارع الدم عن طريق
LC ، ثقافة تجلط وطريقة تقليدية في
169 مريضا الذين كانت الأجسام المضادة ≥160 وحدات دولية بواسطة اختبار تراص المصل.
نتائج دراسة
تم العثور على الإيجابية الشاملة لثقافة الدم لتكون 24.8 ٪ ، و 43.1 ٪ و
34.9 ٪ عن طريق التقنيات التقليدية ، LC وزرع الجلطة في
هذا الترتيب. كان متوسط وقت الاستعادة بواسطة LC وتقنيات استزراع الجلوت أقل بكثير من الطريقة التقليدية ،
مما أدى إلى اختلاف إجمالي ما يقرب من 6 و 4 أيام على التوالي.
الاستنتاج
لعزل - الحمى المالطية - البروسيلا من الدم ، تقنيات LC و زراعة الجلطات أفضل من التقنية التقليدية.
المقدمة حول نسبة الحمى المالطية في الدم
- الحمى المالطية - مرض متوطن في بلدان اجتماعية واقتصادية متدنية والأنواع انتشارا مما
تسبب في إصابات بشرية هي بروسيلا مالطية و - الحمى المالطية -البروسيلا المجهضة . الاتصال مع الحيوانات
المصابة، واستهلاك الحليب الخام والجهل بشأن هذا المرض، هي عوامل الخطر الرئيسية. بما
أن المظاهر السريرية لهذا المرض ذات طبيعة بروتينية ، فإن المساعدة المخبرية ضرورية
في التشخيص. في المختبر ، يتم تشخيص الحمى المالطية إما عن طريق عزل العامل المسبب
و / أو عن طريق الاختبارات المصلية. على الرغم من توافر مجموعة من الاختبارات المصلية
، يعتبر اختبار رقة البنغال الوردية
(RBPT) واختبار تراص المصل (SAT) الأكثر استخدامًا. تكون حساسية الـ RBPT عالية إلى حد كبير ، لكن خصوصية هذه الطريقة أقل بكثير عند
استخدامها لاختبار الأفراد المقيمين في منطقة موبوءة. وبالطريقة نفسها ، فإن SAT ، المستخدمة لتأكيد النتائج RBPT ،
لها أيضًا قيود نقص في الحساسية. كما خصوصية وبصرف النظر عن هذا ، لا يوفر الاختبار
المصلية دليل مباشر على وجود الممرض ، وبالتالي ، عزل البروسيلا النيابة. من العينة
السريرية يعتبر المعيار الذهبي.
تم تطوير العديد من الطرق لزراعة بروسيلا spp. من عينة الدم ، بما في ذلك طريقة رويز-كاستانيدا التقليدية
(النظم) ، النظم الآلية ، تركيز التحلل
(LC) وثقافة الجلطة بشكل عام ، يتم تنفيذ ثقافة الدم في بروسيلا
بواسطة Castaneda التقليدية
الطريقة التي يتم فيها حقن عينة الدم مباشرة في المرحلة السائلة من وسط كاستانيدا.
على الرغم من أن النتائج بهذه الطريقة مرضية في الحالات الحرجة غير المعالجة ، فإن
فترة الحضانة المطلوبة طويلة جدًا. يتم تخفيض معدل العزل بشكل ملحوظ في الحالات المعالجة
أو مرضى - الحمى المالطية - داء البروسيلات الحاد / المزمن. وقد أظهرت التقارير السابقة زيادة في معدل
العزل وانخفاض وقت الاسترداد من خلال تكييف تقنية LC. ،ومع
ذلك ، تتطلب كل من الطرق التقليدية و
LC عينة دم واحدة أخرى للثقافة بمجرد العثور على اختبار مصلي إيجابي. وحيث أنه
من الصعب الحصول على عينة دم إضافية للمرضى الجاهلين ، يمكن أن تكون ثقافة الجلطة خيارًا
أفضل. لقد جرب العديد من العمال عزل السالمونيلا عن طريق تجلط الجلطة وتعتبر التقارير
عن ثقافة الجلطات في بروسيلا نادرة ومثيرة للجدل. ومن هنا في هذه الدراسة ، تم إجراء
محاولة لمقارنة LC ، ثقافة القشرة وتقنيات الثقافة التقليدية
لعزل البروسيلا من عينة الدم في منطقة موبوءة.
المواد والأساليب في تحديد نسبة الحمى المالطية في الدم
تم تنفيذ ثقافة الدم من خلال جميع التقنيات الثلاثة في 169 من أصل 191 مريضا
تظهر SAT عيار SAT من 160 وحدة دولية (IU) بعد الحصول على
موافقة خطية. اعتمادا على مدة المرض ، تم تقسيم المرضى إلى ثلاث مجموعات على النحو
التالي: الحادة (<8 أسابيع) ، دون الحاد (8-52 أسابيع) و brucellosis المزمن (> 52 أسبوعا). واعتبر المرضى ل الإصابة بالعدوى
/ إعادة العدوى إذا عادت الأعراض إلى الظهور في غضون عام بعد الانتهاء من معالجة المضادات
الحيوية.
تم جمع خمسة مل من الدم بشكل معقم من المرضى الذين يعانون من الأعراض السريرية
التي تشبه الحمى المالطية (الحمى ، والشعور بالضيق ، وآلام المفاصل ، وانخفاض
آلام الظهر ، والصداع ، وفقدان الوزن) في زجاجة من البلاستيك المعقم والمغطى بالبرغي
مع 6-7 حبات زجاجية قطرها 2 مم . تم السماح للعينة بالتجلط. تم الطرد المركزي للعينة
عند 2000 دورة في الدقيقة لمدة 15 دقيقة ؛ تم فصل المصل مطهرًا واستخدامه في علم الأمصال.
تم الحفاظ على الجلطة في الثلاجة لثقافة الجلطة إذا لزم الأمر.
تم جمع عينة الدم للتقنية التقليدية وتقنية LC من المرضى الذين لديهم عترات SAT (≥160 IU). تم جمع حوالي 10 مل من الدم في البالغين و 5 مل في حالة الأطفال.
تم توزيع العينة بالتساوي ومعالجتها لثقافة الدم التقليدية وتقنية LC.
تقنية LC
تم استخدام الإجراء الذي وصفه
Etemadi et al . مع تعديل طفيف تم إضافة 5 مل من الدم إلى 40 مل من الماء
المقطر المعقم مع 1.5 مل من 4٪ سترات الصوديوم عند البالغين و 2.5 مل أضيف إلى 20 مل
من الماء المقطر المعقم مع 0.75 مل من سيترات الصوديوم 4 ٪ في الأطفال ، في أنبوب الطرد
المركزي غطاء الرأس العقيمة. تم خلط المحتويات بلطف وتم طرد الطرد المركزي عند
7000 دورة في الدقيقة لمدة 30 دقيقة. تم التخلص من المادة الطافية وتم تلقيح الرواسب
في وسط كاستانيدا ، بدلا من لوحة الثقافة.
تقنية زراعة الجلطة
تم الحفاظ على تجلط الدم في الأنبوب البلاستيكي المغطى بالبرغي المعقم مع الخرز
الزجاجي بعد إزالة المصل المستخدم في هذه الطريقة. تم تعطيل الجلطة عن طريق هز الأنابيب
على شاكر لمدة 15 دقيقة. ثم تم تلقيح الجلطة المتقطعة في وسط كاستانيدا.
حضانة
احتضنت وسائل الإعلام عند 37 درجة مئوية مع 10 ٪ CO 2 لمدة
أقصاها 30 يوما.
تسجيل النتائج
لوحظت الزجاجات يوميا للنمو. تم إجراء الاستزراع الفرعي عن طريق السماح بتدفق
خليط مرق الدم خلال المرحلة الصلبة. تم تسجيل يوم ظهور المستعمرة الأولى للمقارنة بين
معدلات النمو.
تحديد وتأكيد العزلات
وقد تم التعرف على العزلات على أساس مورفولوجيا مستعمرة، وصمة عار غرام، المعدل
"زد" تلطيخ، CO 2 المطلب، الاختبارات البيوكيميائية مثل أوكسيديز واليورياز،
H 2 إنتاج
S لمدة 4 أيام والنمو في وجود بالفوكسين الأساسي (1: 50000 و 1 : 100000) وثيونين
(1: 25000 ، 1: 50000 و 1: 100000). تم إجراء التأكيد المؤقت والكتابة الحيوية للعزل
عن طريق إجراء اختبار تراص الشرائح باستخدام B. abortus و
B. melitensis monospecific antisera (Murex Biotech). تم تأكيد العزلات
في IVRI Izatnagar / DRDE Gwalior.
تمت الموافقة على الدراسة من قبل اللجنة الأخلاقية المؤسسية.
تحليل احصائي
تم تنفيذ التحليل الإحصائي للبيانات بواسطة برنامج GraphPad InStat الذي صممه GraphPad Software،
Inc. تم استخدام اختبار مربع كاي مع تصحيح يات للمقارنة.
النتائج
تم تنفيذ ثقافة الدم من خلال جميع التقنيات الثلاثة في 169 من 191 مريضا. تم
العثور على الإيجابية الشاملة لثقافة الدم لتكون 24.8 ٪ ، و 43.1 ٪ و 34.9 ٪ عن طريق
تقنيات زراعة القوقعة التقليدية ، LC و
clot على التوالي. وترد في الجدول 1 معدلات العزل في المرضى الذين
يعانون من - الحمى المالطية - داء البروسيلات الحاد المزمنة دون الحاد ، والانتكاس / عودة العدوى من خلال
تقنيات الاستزراع المختلفة
.
الجدول رقم 01
عند مقارنتها بتقنية
LC التقليدية وأساليب زراعة الجلطة ، فقد أسفرت عن نمو في عدد أكبر بكثير من الحالات ( P <0.0001). كان
معدل العزلة عالية في المرحلة الحادة مقارنة مع مرحلة الحاد. لا يمكن عزل البروسيلا - الحمى المالطية - في المرضى المزمنين بأي من الطرق.
متوسط وقت الاسترداد للتقنية التقليدية كان 9.61 يومًا (الانحراف المعياري [SD] ± 1.68) ، بينما كانت تقنيات LC و clot culture 4.08 (SD ± 0.87 ؛ P <0.0001) و 5.83
(SD ± 1.37 ؛ P <0.0001) على
التوالي. في المرحلة الحادة ، كان وقت الاسترداد أقل نسبياً من خلال جميع الطرق الثلاث
[ الجدول 2 ]. شوهد النمو المبكر بواسطة التقنية التقليدية في اليوم السادس حيث كان
في اليوم الثالثاليوم مع كل من تقنيات زراعة الجلطات LC و. وأظهرت تقنية LC نموًا مبكرًا في مزارع الدم بنسبة 96٪ ، قبل ظهور الثقافة
الإيجابية الأولى بالطريقة التقليدية ، في حين أسفرت ثقافة الجلطات عن نمو مبكر في
42.55٪ من الثقافات. كان الحد الأقصى لوقت الحضانة اللازمة لتكون ثقافية إيجابية عن
طريق LC ، ثقافة تجلط ، والتقنية التقليدية 6 و 9 و 16 يوما على التوالي. بعد
16 عشر يوما، لم يتم العثور على الثقافة الإيجابية، على الرغم من وحضنت الثقافات ل1
الشهر. على الرغم من الحد الأقصى من الاحتياطات المعقمة التي اتخذت أثناء جمع العينات
ومعالجتها ، كان معدل التلوث مرتفعًا لثقافة الجلطة (5.32٪) يليها LC (2.95٪) ، وقد يرجع ذلك إلى عدد أكبر من التلاعبات المطلوبة للإجراء. أي من
الثقافات التقليدية أظهرت التلوث.
الجدول رقم 02
نقاش
في هذه الدراسة ، وجد أن إيجابية ثقافة الدم هي 24.8٪ و 43.1٪ و 34.9٪ ووقت
التعافي 10 و 4 و 6 أيام بواسطة تقنيات زراعة القوقعة التقليدية ، LC و clot على التوالي. تشير
النتائج التي توصلنا إليها إلى أن طرق زراعة الجلوكوز LC وطرق التجلط أكثر حساسية وتتطلب وقتًا أقل من الثقافة التقليدية
مما يساعد في الكشف المبكر عن العدوى. من بين تقنيات LC و
Culture of Lot ، كان LC أفضل بسبب زيادة
معدلات العزل وانخفاض وقت التعافي. تم الإبلاغ عن نتائج مماثلة من قبل Etemadi وآخرون ، Mantur
و Mangalgi و Espinosa et al ،
كان متوسط وقت الاسترداد بواسطة LC في هذه الدراسة 4.08 يومًا ، وهو ما يتفق مع Espinosa et al . ، ولكنه أكثر بقليل مقارنة بنتائج
2 و 2.7 يومًا بواسطة Etemadi et
al . ، و Mantur و
Mangalgi. ،
في دراسة أجراها
Escamilla et al ، وجد أن تقنية
زراعة الجلطة أقل حساسية وأكثر كثافة في العمل عند مقارنتها بالطريقة التقليدية. وعلى
عكس دراستنا ، كانت تقنية زراعة الجلطة أكثر حساسية وكذلك وقت الاستشفاء. كان أقل بالمقارنة
مع الطريقة التقليدية. تم الإبلاغ عن نتائج مماثلة من Mantur وزملائه ، ميزة أخرى لهذه التقنية هي أن الحاجة إلى عينة
دم واحدة أخرى قد خففت.
في دراسة أجراها إسبينوزا وآخرون ، كان معدل العزل أعلى في الحالات شبه الحادة
من المرضى الذين يعانون من داء البروسيلات - الحمى المالطية - الحاد بواسطة تقنية LC. في حين تم الإبلاغ
عن معدلات عزل أعلى بكثير في كل من المراحل الحادة والمزمنة من Mantur و Mangalgi. في دراستنا
، كان معدل الإيجابية للثقافة عالية في المرضى الذين يعانون من الحادة تليها داء البروسيلات
تحت الحاد ، ونمت أيا من الحالات المزمنة بروسيلا .
وبما أن المرضى في دراستنا لم يتم إعفاؤهم من أعراضهم لفترة طويلة ، فقد تحولوا
إلى العديد من الأطباء قبل تشخيصهم كحالات داء البروسيلات - الحمى المالطية - في مستشفانا ، والتي يمكن
أن تكون سمة لمعدلات عزلنا المنخفضة. تم استنباط تاريخ من 3-4 دورات على الأقل من المضادات
الحيوية في 116 (68.63 ٪) من المرضى.
بشكل عام ، يتم محاولة ثقافات الدم لتأكيد التشخيص المصلية المفترضة. لا سيما
في المناطق الريفية ، بسبب سوء الفهم أن الدم المفقود في وقت ما ضاع إلى الأبد وفقد
الدم يعزز المرض ؛ من الصعب الحصول على عينة دم إضافية للثقافة في الأفراد المصابين
بالفيروس. في مثل هذه الحالات وكذلك في الظروف الميدانية (المخيمات) ، حيث يكون الحصول
على عينة ثانية للثقافة أمرًا صعبًا ، يمكن أن تكون ثقافة الجلطة هي البديل الأمثل.
تتطلب كل من تحلل و ثقافة التجلط التلاعب ، مما يعزز فرص العدوى المختبرية والتلوث
، مما يستلزم إجراءات صارمة للسلامة الأحيائية و التدابير المعقمة.
الاستنتاجات حول نسبة الحمى المالطية في الدم
نقترح أنه لعزل البروسيلا - الحمى المالطية - من عينة الدم ، طريقة LC أفضل من طريقة Castaneda التقليدية حيث أن معدل العزل مرتفع ووقت التعافي أقل. تعتبر
ثقافة الجلطة خيارًا أفضل عندما لا يمكن الحصول على عينة دم ثانية من أجل الثقافة.
ونظراً لأن تقنيات التحلل والتكتل تكون حساسة وبسيطة وغير مكلفة وتنتج عنها نتائج مبكرة
، فيمكن تكييفها في المناطق المتأخرة فنياً واقتصادياً حيث تكون الأنظمة الآلية بعيدة
عن متناول اليد. ومع ذلك ، لمنع هذه العدوى المكتسبة من المختبر ، يجب تنفيذ هذه الأساليب
في الخزانة للسلامة الأحيائية من الفئة الثانية مع احتياطات BSL-3.
المرجع : https://www.ncbi.nlm.nih.gov
تمت الترجمة من طرف فريق صحة أون لاين
نسبة الحمى المالطية في الدم